J4 ›› 2009, Vol. 44 ›› Issue (5): 10-19.
胡宝庆1,刘毅2,文春根1*
HU Baoqing1, Li Yi2, WEN Chungen1*
摘要:
利用RTPCR和RACEPCR方法,从翘嘴鳜中克隆出髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)cDNA全长。其开放阅读框有2?292个核苷酸,编码763个氨基酸的蛋白。虽然序列相似性分析发现该蛋白与哺乳动物MPO相似性为64%~65%,但分子质量大小相近。翘嘴鳜含有1个与人MPO相似的血红素基,1个保守的Ca2+结合位点,6个分子内二硫键,以及6个糖基化位点。由此推测翘嘴鳜MPO蛋白的空间结构及催化机制可能与哺乳动物的相似。将翘嘴鳜MPO的部分DNA序列连接到pET32ac(+)载体上,成功构建了1个重组表达质粒pETMPO,该质粒在大肠杆菌(DE3)中获得了高效表达。另外,利用重组蛋白N末端带有的6×His标签,通过Ni2NTA柱纯化获得了翘嘴鳜MPO重组蛋白。
中图分类号:
[1] | 李同明,周芬娜,崔志峰,季相山,王慧*. 尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体 IA基因克隆与多态分析[J]. J4, 2013, 48(11): 14-22. |
[2] | 秦兆宇,张小葵,何 峰,刘师莲* . 生物体液差异蛋白质组学研究技术体系的建立[J]. J4, 2008, 43(5): 6-09 . |
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